基因敲除技术-基因敲除技术的原理

基因敲除技术的原理、方法和应用？

1 基因敲除技术是一种通过人为手段消除目标基因的方法，是一种高效缺失模拟方法，能够模拟基因改变和自然选择的过程，适用于生命科学领域的基础研究。

2 基因敲除技术的原理是通过DNA重组技术，将目标基因的部分或全部序列替换成选择标记等，从而实现基因的失活或删除。

方法包括质粒载体介导的敲除技术、CRISPR/Cas9介导的基因敲除技术等。

3 基因敲除技术的应用十分广泛，可以用于探究基因功能、研究基因在正常生理状态和疾病状态下的作用等，对于疾病治疗和新药研发的研究也有着很大的帮助。

同时，基因敲除技术也是人工合成生命体和生物安全领域的重要手段之一。

基因敲除技术的原理是什么？

基因敲除是将细胞基因组中某基因去除或使基因失去活性的技术。去除原核生物细胞、真核生物的生殖细胞、体细胞或干细胞基因组中的基因等。广义的基因敲除包括某个或某些基因的完全敲除、部分敲除、基因调控序列的敲除以及成段基因组序列的敲除。常用同源重组的方法。敲除的基因用以观察生物或细胞的表型变化，是研究基因功能的重要手段。

转基因和基因敲出和敲入分别是什么意？

转基因动物(Transgenic animal) 指基因组中整合有外源基因, 并能表达和遗传的一类动物。转基因体系打破了自然情况下的种系隔离, 使基因能在种系遥远的机体间流动, 既可加快家畜品种的改良力度, 提高畜产品品质, 又可生产珍稀药用蛋白.

基因敲除指利用染色体间基因打靶的原理，通过将设计好的打靶载体导入细胞后，同源臂发生同源重组，从而在基因组的某个特定位点引入预定的突变，获得基因型发生了改变的动物。可以分为基因敲入和基因敲出：基因敲入即引入新的基因或突变；基因敲出即使某个特定的基因得到破坏，可以用于研究基因的功能。

什么是基因编辑脱靶？

基因编辑可以‘指哪打哪’。一般只要 20 个核苷酸序列就能对一个基因进行定位并定点敲除。但同时，在基因组序列中，与特定 20 个核苷酸序列相近的碱基片段非常多。

基因编辑过程中，与导向 RNA 靶向目标很接近的片段，也会结合上去并被敲除掉，这就是所谓的‘脱靶’。